Taq DNA Polymerase含预混Mg2的10 Taq Buffer

　　 Taq DNA Polymerase(含预混Mg2的10 Taq Buffer)

　　产品特点

　　Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的，其分子量为 94 KD。Taq DNA Polymerase 具有5-3’DNA聚合酶活性和 5-3’外切核酸酶活性，无 3-5’外切酶活性。在 PCR 反应中，Taq DNAPolymerase延伸速度为 1-2 kb/分钟，产物 3’端带 A，可直接用 TA 载体克隆。

　　使用方法

　　（注 意：以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、

　　引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）

　　注 意：

　　A 引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

　　B 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系）

　　注 意：

　　a 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。

　　b 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq DNA Polymerase 的扩增效率为 1 kb/30 sec。

　　C 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）

　　 结果检测：

　　反应结束后取 5 μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。