TIRF 显微镜

在基于物镜的 TIRF 中，激光被二向色镜反射进入物镜，发生全反射后会再次被二向色镜反射，发射片不仅要阻挡入射激光的散射光，还要阻挡全反射后的激光以及高角度的散
射光。相对于共聚焦显微镜，TIRF 需要更高的截止深度 (OD8 -10+) 才能消除激光噪音的干扰。
为了保证形成完美的渐逝场，避免溶液本底中样品的激发，TIRF 对二向色镜平整度的要求要高于普通激光显微镜，需要控制在 0.5 waves/inch (flatness) 及以下。另外，二向色镜的厚
度也必须在 2mm 及以上，以避免安装固定时外界应力对平整度的影响。

ET 系列 - TIRF 单波段带通滤光片组
单个发射片具有 OD6 - 7 的截止深度，在单色TIRF 滤光片组中，通过将一个带通发射片和一个长通发射片组合使用，可以实现 OD12+ 的截止深度。常规的显微镜cube 只能安装最大厚度3.5 mm 的发射片和1mm 厚的二向色镜，TIRF 滤光片组需安装在的专利TIRF cube 中。

ET 系列 - TIRF 单波段长通滤光片组

ET 系列 - TIRF 多波段带通滤光片组

对于多色 TIRF，根据显微镜结构的不同，会有两种不同的滤光片组配置。如果显微镜配有滤光片转轮，可将一个常规的多波段发射片 (OD6 - 7 的截止深度) 装到显微镜cube 中，在滤光片转轮中装上相应数量的单波段带通发射片 (OD6 - 7 的截止深度，最后一个波段可用长通发射片 )。通过转轮切换不同的带通发射片可收集不同波段的荧光信号。将单波段带通发射片和多波段发射片匹配使用可在对应激光波长处提供OD12+ 的截止深度。

对于没有滤光片转盘的显微镜，通过特有的工艺将两片相同的多波段发射片 (OD6 - 7 的截止深度 ) 封装到一个金属外圈中（厚度较常规滤光片要厚），从而实现 OD8 - 10+ 的截止深度。

1. 405 nm 激光用于光激活。

Chroma TIRF 专用 cube
相比于常规激光显微镜，TIRF 对二向色镜的平整度和厚度都有更高的要求。平整度需要控制在 0.5 waves/inch 及以下，二
向色镜的厚度也必须在 2mm 及以上，以避免安装固定时外界应力对平整度的影响。常规的显微镜 cube 无法安装厚度 2mm 及
以上的二向色镜。另外，由于材质主要为塑料，抗形变能力也较差。针对 TIRF 应用，我们推出了具有专利保护的 TIRF 专用
cube ( 专利号 : US8488238B2)，具有如下特点：
(1) 能够安装最大3 mm 厚度的二向色镜；
(2) 能够安装最大厚度6 mm 的发射片，可以通过两个发射片叠加的方式提高在激光谱线及其附近的OD 值；
(3) 金属材质，抗形变能力强，对安装的二向色镜不会产生应力。

1. Chroma TIRF cube 不单独出售，需由 我们安装 TIRF 二向色镜并校正其平整度；
2. TIRF 二向色镜采用胶水固定。