COS-1细胞（非洲绿猴SV40转化的肾细胞）_科研专用

COS-1细胞源自CV-1细胞株，经转染编码野生型T抗原但起始点缺陷突变的SV40得到，细胞中整合有SV40基因组完整早期区段的单个拷贝。COS-1细胞表达T抗原，适用于需要SV40T抗原表达的载体的转染。COS-1细胞保留了SV40溶细胞性生长的特性，支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制，支持早期区段缺失的SV40纯体的复制。

传代方法：
1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；

注意事项：
不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间；
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

冻存操作 ：
冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格：200-300万/ml，1ml每管

冻存方法：1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存

注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

我们推荐使用尚恩生物 非洲绿猴SV40转化的肾细胞专用培养基（产品货号：SNLM-288）作为COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞)的专用培养基。

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