LABSELECT 质粒小提试剂盒

　　质粒小提试剂盒

　　本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，再通过离心吸附柱在高盐状态下选择性地吸附DNA 的方法达到快速纯化质粒DNA的目的。适用于提取1-5ml过夜培养的大肠杆菌，质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件，细胞的裂解，质粒拷贝数，质粒的稳定性，抗生素等因素有关。高拷贝质粒最多可提取30ug质粒DNA，低拷贝质粒最多可提取12ug质粒DNA。

　　使用本试剂盒提取的质粒DNA可用于PCR、测序、酶切、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等实验操作。

　　储存条件

　　试剂盒于常温运输，未开启的试剂盒可以于室温(15-25℃)干燥条件下保存12个月。如需更长的保存时间，可将试剂盒置于2-8℃。

　　第*次使用前将RNase A加入Buffer S1中，混匀后置于2-8℃保存，可稳定保存12个月以上。

　　2-8℃保存条件下，溶液可能产生沉淀，需在使用前将试剂盒内的溶液在室温静置一段时间，或在37℃水浴中预热10 min，即可溶解沉淀。

　　注意事项（请务必在使用前仔细阅读此注意事项。）

　　1．Buffer S1在使用前先加入RNase A（将试剂盒中提供的RNase A全部加入），混匀，置于2-8℃保存。

　　2．使用前请先检查Buffer B、Buffer S2和S3是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中预热10 min，即可恢复澄清。

　　3．所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心，速度为12,000rpm (~13,400×g )。

　　4．实验前使用Buffer B处理吸附柱，可以*大限度激活硅基质膜，提高得率。用Buffer B处理过的柱子*好当天使用，放置时间过长会影响效果。

　　5．Buffer P可以有效去除残留的蛋白污染，当宿主菌为endA+（TG1、BL21、HB101、 ET12567、JM系列）等核*酶含量较高的菌株时，强烈推荐使用Buffer P。

　　6.如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，建议使用5-10ml过夜培养的菌液，同时按照比例增加S1、S2、S3的用量，Buffer E应在65-70℃水浴预热，在吸附和洗脱时适当延长时间，以增加提取效率。其他步骤相同。