2RAPA3G Multiplex PCR Mix

　　2RAPA3G Multiplex PCR Mix

　　描述：

　　Multiplex PCR 又称多重 PCR，是指在同一 PCR 反应体系里加上两对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR 反应，已被广泛应用于科学研究和疾病诊断等多个领域，特别适用于微量样本的多位点检测。

　　本制品使用具有极强扩增性能的热启动 RAPA3G DNA聚合酶和优化的多重 PCR 反应缓冲液，使其可有效扩增 20重以上的 PCR，具有极高的灵敏度，程度上减少了反应体系优化步骤。

　　储存：长期储存置于-20°C 以下，可保存 2 年；短期使用置于 4°C（3 个月）保存。

　　请注意：该制品为热启动制品预变性步骤 5min 不可缩短，否则 DNA 聚合酶无法恢复活性。

　　3. 电泳：1kb 以内的扩增产物建议使用 3%~4% 琼脂糖凝胶，电压使用 80V，可以有效的分离各扩增片段。

　　注意事项：

　　（1）当模板 GC 含量>70%时，请添加 5×Q-Solution。

　　（2）推荐引物设计原则：引物长度保持在 22 - 30 bp，扩增产物长度在 2kb 以下，GC 含量 50% - 60%，尽量减少各引物之间 TM 的差值。

　　（3）检测单引物特异性：多重 PCR 反应前，应对设计的引物逐一扩增，以确定是否有非特异性扩增和扩增效率。

　　（4）引物推荐使用浓度：推荐扩增片段<300bp 每条引物的反应终浓度为 0.2-0.3μM，扩增片段>300bp 每条引物的反应终浓度为 0.05-0.15μM，如某些目标片段产量偏低或偏高，可适度调整其对应引物使用量以优化反应结果。