100管/48样氨基比林-N-去甲基化酶AND测试盒微量法

100管/48样氨基比林-N-去甲基化酶(AND)测试盒(微量法)

测定意义：

　　细胞色素P450酶是一组在外源物质代谢中，尤其是药物和毒物，具有重要作用的酶系。AND作为P450酶系的重要一员，相当于CYP3A4亚型，与药物的去甲基化反应密切相关。

测定原理：

　　AND催化氨基，通过Nash比色法测定，即可计算出AND活性。

自备仪器和用品：

　　普通离心机，超速离心机、水浴锅、可调式移液枪、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、无水乙醇和冰。

试剂组成和配制：

　　试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加100mL蒸馏水充分溶解。

　　试剂二：液体×1瓶，4℃保存。

　　试剂三：粉剂×1管，4℃避光保存。临用前加入1mL无水乙醇，充分溶解。

　　试剂四：粉剂×1管，4℃保存。临用前加入0.5mL蒸馏水，充分溶解。

　　试剂五：粉剂×1瓶，室温保存。临用前加蒸馏水4mL充分溶解。

　　试剂六：液体×1瓶，室温保存。

　　试剂七：液体×1瓶，4℃保存。

　　标准液：液体×1瓶，-20℃保存。临用前取1.5mL EP 管，加入10μl标准液，加990μl蒸馏水，混匀即为0.05 mmol/L标准溶液，4℃保存。

注意事项：

　　1、粗酶液需在当日完成测定，如需保存，则向粗酶液提取步骤3的沉淀中加0.5ml 20%的甘油，分装后，-80℃保存；

　　2、试剂三和试剂四需临用前配制，如当天没有用完，4℃避光保存，可用1周；

　　3、粗酶液可直接用于蛋白浓度测定，建议用BCA法测蛋白含量。