联系人:周晶
邮箱:2881505696@qq.com
电话:13524666836
地址: 上海金山区枫泾环东一路65弄2号3333室
| 品牌 |
gelatins/江蓝纯 |
型号 |
JC_CC5597 |
| 加工定制 |
是 |
产地 |
国内 |
| 厂家 |
上海机纯实业有限公司 |
|
cDNA链合成试剂盒(去除基因组)
产品特点
本产品含有反转录反应所需的全部试剂,浓度为 5×。反应时,只需加入gDNARemover、模板 RNA 和水即可高效地合成链 cDNA,同时去除RNA模板中残留的基因组 DNA。该产品操作简便,降低操作过程中的污染机率。
它具有下列特点:
1. 去除 gDNA 快,只需室温5分钟,就可以实现去除基因组DNA污染。
2. 方便快捷:mix 配制,组分更少,操作更快;逆转录只需5-10分钟就可以完成。
3. 对后续 qPCR 反应适用性广:通过组分和 Buffer 优化,使带入到后续qPCR反应的逆转录反应液的影响降到。
4. 高灵敏度:对极少量的 RNA 模板也可以进行良好的反转录反应。
使用方法
1. 去除基因组:根据以下表格配制反应体系,总体积为 10μl。为了保证反应液配制的准确性,先按反应数+2 的量配制预混体系,然后再分装到每个反应管中,加入RNA。
注意:如果总 RNA 量大于 1 ug,请按比例扩大反应体系)将反应液轻轻搅拌均匀,短暂离心使管壁上的溶液收集到管底,室温或25-37℃温育5分钟。
2. 反转录反应:在上述反应液中加入 4μl 5×cDNA RT Mix,6μl RNase-Free Water,轻轻混匀,短暂离心;50℃孵育 5-15 分钟;85℃加热 3 分钟使酶失活;置于冰上进行后续实验或冷冻保存。
注意:Real-time qPCR 时,作为模板直接稀释后添加(添加到 PCR 反应液中的反转录稀释液,尽量不要超过 20%,以免导致 PCR 反应效率低下,无法准确定量)