Taq DNA Polymerase含预混Mg2+的10 xTaq Buffer

Taq DNA Polymerase含预混Mg2+的10 xTaq Buffer

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品牌 gelatins/江蓝纯
型号 JC_CC5588
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产品详情
品牌

gelatins/江蓝纯

型号

JC_CC5588

加工定制

产地

国内

厂家

上海机纯实业有限公司

Taq DNA Polymerase(含预混Mg2+的10 × Taq Buffer)

产品特点

  Taq DNA Polymerase是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为 94 KD。Taq DNA Polymerase 具有5-3’DNA聚合酶活性和 5-3’外切核酸酶活性,无 3-5’外切酶活性。在 PCR 反应中,Taq DNAPolymerase延伸速度为 1-2 kb/分钟,产物 3’端带 A,可直接用 TA 载体克隆。

  本产品仅供科研使用,不得用于其它用途

使使用方法

  (注 意:以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、

  引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化)

注 意:

  A .引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

  B. 镁离子浓度请以终浓度 1.5-3mM 作为设定范围的参考。可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度,由此优化反应体系)

注 意:

  a. 一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。

  b. 延伸时间应根据所扩增片段大小设定,Taq DNA Polymerase 的扩增效率为 1 kb/30 sec。

  C. 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数)

3. 结果检测:

  反应结束后取 5 μl 反应产物,加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。

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