快捷型植物基因组DNA提取试剂盒

快捷型植物基因组DNA提取试剂盒

产品及特点

　　本试剂盒适用于从多种植物的不同组织中快速提取高质量的基因组DNA，采用独特的缓冲液系统，特别适合从植物干粉或者新鲜植物材料中提取基因组DNA。提取过程不需要等有机试剂抽提，安全快捷。使用安全方便，可有效去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制，实验者可根据自己的需求灵活调整。提取的基因组 DNA大，纯度高，质量稳定可靠使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作。

它具有下列特点：

　　1. 简便快速：

　　1 小时内可获得高纯度的基因组 DNA；

　　2. 纯度高：可直接进行 PCR、文库构建、酶切和杂交等分子生物学实验；

　　3. 使用方便：安全、无毒，无需抽提。

使用方法

　　1. 取植物新鲜组织 50-100 mg 或干重组织约 20 mg，加入液氮充分研磨。

　　2. 将研磨后的粉末收集到离心管（自备）中，加入 400 μl 缓冲液QP1 和6 μl 的RNaseA(10mg/ml)，旋涡振荡 1 min，室温放置 10 min。

　　(注 意：由于植物材料多样性非常丰富，所取实验材料的最适量需根据材料的不同，或相同材料的不同组织等进行摸索)

　　3. 加入 130 μl 缓冲液 QP2，充分混匀，涡旋振荡 1 min。

　　4. 12,000 rpm (-13,400×g )离心 5 min，将上清转移至新的离心管中。

　　5. 可选步骤：将上清液再次 12,000 rpm (-13,400×g )离心 5 min，将上清转移至新的离心管中。

　　(注 意：此步骤目的为去除上清液中的沉淀杂质，使提取基因组 DNA 纯度更高。)

　　6. 向上清液中加入 0.7 倍体积的，充分混匀，此时会出现絮状基因组DNA。（例如 500 μl 的上清液加 350 μl ），12,000 rpm(-13,400×g )离心2 min，弃上清，保留沉淀。

　　7. 加入 600 μl 70%乙醇，涡旋振荡 5 sec，12,000 rpm(-13,400×g )离心2 min，弃上清。

　　8. 重复步骤 7。

　　9. 开盖倒置，室温 5-10 min，彻底晾干残余的乙醇。

　　(注 意：乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR 等实验。)

　　10. 加入适量 Buffer EB，65℃水浴 10-60 min 溶解 DNA，其间颠倒混匀数次助溶，得到 DNA 溶液。

注意事项

　　1. 缓冲液 FP1 可能会发黄，并不影响提取效果。若 Buffer QP1 或Buffer QP2 有沉淀析出，可在 37℃水浴溶解，摇匀后使用；

　　2. 所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心；

　　3. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的 DNA较小且提取量也下降。